【PCR儀的種類】

　　分類總是五花八門，總體來說可以分為PCR擴(kuò)增儀和實時熒光PCR儀兩大類，有人也把它們稱為半自動和全自動，或者定性和定量，都是比較不準(zhǔn)確的稱呼。

　　PCR最重要的就是個升降溫過程，最初的水浴鍋式PCR，就是三個水浴箱，一個機(jī)械臂，定時抓出反應(yīng)槽轉(zhuǎn)換水浴鍋。這種東東體積大，迅速慢，但其實結(jié)果并不比以后的PCR儀差，我現(xiàn)在都很欣賞。后來有人利用致冷和加熱做成了，固定位置升降溫的PCR擴(kuò)增儀。

　　后來隨著定量技術(shù)的發(fā)展，有公司將擴(kuò)增儀和檢測做成一體，也就成了現(xiàn)在所謂的全自動(或定量)PCR儀。當(dāng)然標(biāo)準(zhǔn)的叫實時熒光定量PCR儀。

　　【品牌】

　　什么東西都有品牌，現(xiàn)在國內(nèi)國外PCR儀的品牌很多，就國外而言比較著名的有：

　　ABI美國應(yīng)用生物公司：老牌的生物公司貴族，其收購了原來的PE，而PE公司是PCR的鼻祖，旗下有很多經(jīng)典的PCR儀，有5700(已停產(chǎn))、7700(已停產(chǎn))、7000、7900等實時熒光定量PCR儀。

　　ROCHE羅氏診斷：炙手可熱的新貴，LIGHTCYCLER是其唯一的PCR儀，市場做得很不錯，以科研定位為主，但在國內(nèi)很多醫(yī)院使用，其很特色離心、氣加熱、毛細(xì)管等，設(shè)計另類，是最有特色的PCR儀，當(dāng)然好壞另議，就單其另辟蹊徑的技術(shù)能力和膽識就值的佩服。

　　MJ：剛?cè)胫袊拿�，MJ的擴(kuò)增儀在生命科研領(lǐng)域比較出名，其產(chǎn)品比較適合高通量檢測，人類基因組計劃用得很多。其實時熒光PCR儀剛進(jìn)入中國不久，孔間能使用不同溫度是其特色。這點其實比較有用。

　　伯樂：呵，廉價的麥當(dāng)勞，ICYCLER是其主打，進(jìn)入中國已經(jīng)比較久了，產(chǎn)品和5700一樣，是擴(kuò)增儀上加裝定量模塊而成，特點是價格較低。

　　國內(nèi)現(xiàn)在做的也很多，比如杭州博日、杭州朗基、上海楓嶺、廈門安普利等。

　　【選購】

　　準(zhǔn)確的講包括實時熒光定量在內(nèi)都沒有自動加樣和標(biāo)本處理系統(tǒng)，只能算半自動的。PCR儀是個簡單的東東，一個溫控設(shè)備和一個檢測設(shè)備而已。

　　關(guān)于溫控，主要是介質(zhì)問題。理想的介質(zhì)是導(dǎo)熱性好、比熱大、接觸緊密的東東。

　　這方面最好的是水浴和油浴，比熱大(油比水更大)、溶劑化物體，與反應(yīng)物無縫接觸，效果當(dāng)然最好。但是自動化，小型化難，只有最初的水浴鍋式使用。

　　硅加熱，這是使用最普遍的一種，優(yōu)點：易自動化、速度快、直接加熱降溫，效果當(dāng)然好，但是第一成本較高，第二其使用的介質(zhì)是金屬，導(dǎo)熱雖然好，但是與反應(yīng)管，很難做到無縫接觸，定性時代可以加油，但用熒光定最，由于油有熒光信號不能用。所以在無縫接觸上差一些。第三由于是底部加熱，下部壓力較大，有溢出的可能，不過新的儀器在加熱蓋以后解決了這個問題。

　　空氣加熱，用空氣做介質(zhì)有優(yōu)點，與反應(yīng)體系無縫接觸，但是空氣的導(dǎo)熱性差、比熱小的弱點明顯。因此空氣加熱的要利用離心來產(chǎn)生空氣流動，增強(qiáng)導(dǎo)熱性，同時使用毛細(xì)管，加大接觸面積、試劑微量化來彌補(bǔ)。這樣做了以后效果還是不錯。但有的廠商把什么離心、毛細(xì)管的好處大講特講，對氣加熱的弱點閉口不談，卻是高明的市場手法。同時，使用離心，對標(biāo)本量增大是有影響的并且標(biāo)本量越大，空氣比熱小的弱點就越明顯，所以空所加熱的儀器標(biāo)本量都比較小。使用毛細(xì)管后由于反應(yīng)液與管的接觸面積增大，吸附現(xiàn)象更大，因此試劑的通用性差一般要專門開發(fā)，成本高，雖然試劑用量少，但因為是專用試劑，每人份就是以實際量算，并不省試劑。反而增加了毛細(xì)管成本。

　　關(guān)于功能，所有的PCR儀功能都大體相同。只有MJ孔間能使用不同溫度比較獨特，這對于多項目同時檢測以及循環(huán)參數(shù)的調(diào)整比較有用。但其實時熒光的儀器剛進(jìn)入中國不久，具體如何還不得而知。

　　關(guān)于選購，根據(jù)單位情況而定，由于PCR的技術(shù)含量其實并不高，好的國產(chǎn)儀器如杭州博日(與日本著名廠商大和有關(guān))也差不太多。關(guān)于進(jìn)口儀器，羅氏的儀器不錯，但如果標(biāo)本量大，建議不要用羅氏。一則會累死的。另外，每個標(biāo)本要分?jǐn)偟臉?biāo)準(zhǔn)曲線、對照成本太高。同時，試劑也比較受限。