六味地黃丸處方為：熟地黃160g，山茱萸(制)80g，牡丹皮60g，山藥80g，茯苓60g，澤瀉60g。2005版《中國(guó)藥典》采用高效液相色譜法測(cè)定了山茱萸中馬錢苷和牡丹皮中丹皮酚的含量。有關(guān)六味地黃丸制劑的含量測(cè)定方法總結(jié)如下。

　　一、2005《中國(guó)藥典》六味地黃丸含量測(cè)定項(xiàng)下：

　　山茱萸：

　　色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以四氫呋喃-乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液(1：8：4：87)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為236nm，柱溫40℃。理論板數(shù)按馬錢苷峰計(jì)應(yīng)不低于4000。

　　供試品溶液的制備：取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取約0.7g，精密稱定;或取重量差異檢查項(xiàng)下的大蜜丸，剪碎，取約0.1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲提取(功率250W，頻率33kHZ)15分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液10ml，置中性氧化鋁柱(100～200目，4g，內(nèi)徑1cm，干法裝柱)上，用40%甲醇適量使溶解，并轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

　　牡丹皮

　　色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水(70：30)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為274nm。理論板數(shù)按丹皮酚峰計(jì)應(yīng)不低于3500。

　　供試品溶液的制備：取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取約0.3g，精密稱定;或取重量差異檢查項(xiàng)下的大蜜丸，剪碎，取約0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲提取(功率250W，頻率33kHZ)45分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

　　二、以單皮酚為指標(biāo)

　　李瑋玲等采用SPE-HPLC法測(cè)定六味地黃丸中丹皮酚的含量。高效液相色譜儀為Waters2695;色譜柱為HypersilODS2柱(205mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相為甲醇-2%冰醋酸(55：45);流速為1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為275nm;柱溫25℃。樣品用甲醇超聲提取后經(jīng)Sep-PakC18微柱處理，收集第12～14mL流出液。

　　仲英等采用薄層掃描測(cè)定了六味地黃丸中丹皮酚的含量，采用日本島津CS-910雙波長(zhǎng)薄層掃描儀。層析條件：硅膠G板;展開溶劑：環(huán)乙烷-氯仿-無水乙醇7：3：1。薄層掃描條件：反射法鋸齒掃描，波長(zhǎng)s=274nm,R=365nm;掃描速度20mm/min;狹縫1.25×1.25mm;Sx=3。樣品用無水乙醇回流提取。

　　汪顯陽等用差示光譜法測(cè)定六味地黃丸中丹皮酚的含量，采用島津UV2240分光光度計(jì),751G分光光度計(jì)。樣品用乙醇浸出提取,缺丹皮酚樣品為空白樣品。以蒸餾水和0.01mol/L氫氧化鈉溶液分別定容,選擇352nm為測(cè)定波長(zhǎng),370nm為參比波長(zhǎng)。

　　趙新峰等用膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜法分離測(cè)定中藥材牡丹皮及中成藥六味地黃丸中丹皮酚的含量。定量采用內(nèi)標(biāo)法,選取蘆丁為內(nèi)標(biāo)。Unimicro毛細(xì)管電泳儀美國(guó)Hyperquan.Inc公司。所用毛細(xì)管規(guī)格為55cm有效長(zhǎng)度50cm×75um,檢測(cè)波長(zhǎng)274nm,電壓15kV,背景電解質(zhì)分別為30mmol/LSDS-30mmol/L硼砂,20mmol/LSDS-50mmol/L硼砂pH9.4。供試品溶液的配制：牡丹皮藥材加95%乙醇超聲提取;六味地黃丸粉碎后,與5g硅藻土色譜載體,40～60目混研,研勻,烘干,無水乙醇。

　　宋麗麗等用近紅外光譜法測(cè)定六味地黃丸中丹皮酚，分別采用偏最小二乘PLS、主成分分析-BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、小波變換-BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)對(duì)所采集的樣本數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

　　完茂林等測(cè)定六味地黃丸中丹皮酚的含量，采用毛細(xì)管氣相色譜法,以正十六烷為內(nèi)標(biāo)。日本島津GC-9A氣相色譜儀;色譜柱為熔融彈性毛細(xì)管柱28m×0.28mm,5um,涂布SE-300.26um,N2流速60ml/min,H2流速50ml/min,空氣流速500ml/min,柱溫180℃,汽化器、檢測(cè)器320℃。樣品制備：六味地黃丸研細(xì)用乙醇超聲處理后用中性氧化鋁柱100～200目,10g,φ11mm處理，收集乙醇洗脫液，濃縮并定容。

　　三、以齊墩果酸或熊果酸為指標(biāo)

　　馮燕芹等測(cè)定六味地黃丸(濃縮丸)中熊果酸的含量，采用HPLC法。色譜柱為ALLTIMAC185μ;流動(dòng)相為甲醇-水(80：20);流速為0.5mL/min;ELSD檢測(cè)器漂移管溫度：80℃。樣品用乙醚回流提取。

　　丁晴等測(cè)定六味地黃丸及六味地黃膠囊中齊墩果酸、熊果酸的含量，采用HPLC法。高效液相色譜儀為島津LC-10AD;色譜柱為Shim-PackC18分析柱4.6mm×150mm,5μm;流動(dòng)相為乙腈-甲醇-水-乙酸胺70：16：14：0.5;流速1mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)215nm;柱溫為室溫。樣品處理方法：六味地黃丸(濃縮丸)用水溶解并過濾后，用乙醚加熱回流提取，殘?jiān)檬兔?30～60℃)浸泡，棄去石油醚液，殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ荨?

　　四、以馬錢素為指標(biāo)

　　陳賀新等測(cè)定六味地黃丸中馬錢素的含量，采用RP-HPLC法。高效液相色譜儀為Waters510;色譜柱為YWG-C18柱(150mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相為甲醇-水(1：4);流速為0.8mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為238nm。樣品用甲醇超聲提取。

　　五、多糖、梓醇等

　　汪顯陽等采用苯酚硫酸法測(cè)定了六味地黃丸中多糖的含量。供試品溶液的制備：精密稱取1g六味地黃丸粉末，加80%乙醇加熱回流提取，過濾，殘?jiān)?0%熱乙醇洗滌，再用蒸餾水洗滌，熱蒸餾水洗滌，合并水濾液用蒸餾水定容。

　　劉長(zhǎng)河等用薄層掃描法測(cè)定了六味地黃丸中梓醇的含量，薄層條件：硅膠G板，展開劑為氯仿-甲醇-水(7：3：0.5);碘蒸汽顯色。薄層掃描條件：?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)反射鋸齒掃描，掃描波長(zhǎng)為350nm，狹縫1.2mm×1.2mm，Sx=3。

　　六味地黃丸用80%乙醇超聲處理后，經(jīng)D101型大孔吸附樹脂純化：先以水50ml洗脫，棄去;以20%甲醇50ml洗脫，合并洗脫液，濃縮并定容。

　　趙新峰等測(cè)定中藥材山茱萸及中成藥六味地黃丸中沒食子酸的含量，采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳法，選取肉桂酸為內(nèi)標(biāo)。所用毛細(xì)管規(guī)格為60cm有效長(zhǎng)度45cm×75μm,檢測(cè)波長(zhǎng)271nm,電壓20kV,背景電解質(zhì)為20mmol/L硼砂，重力進(jìn)樣10cm×5s，電泳溫度20℃,每次運(yùn)行前依次用0.1mol/LNaOH溶液、去離子水、電泳緩沖溶液沖洗3min。六味地黃丸用95%乙醇處理。