高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。

　　1、手動(dòng)進(jìn)樣器：平時(shí)應(yīng)該注意使用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進(jìn)樣分析狀態(tài)清洗;如果出現(xiàn)漏液現(xiàn)象，原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染，一般要申請(qǐng)維修或更換配件。

　　2、排液閥：此處不能完全密封或漏液時(shí)一般是其中的墊片污染或磨損，可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。

　　3、單向閥：如遇到泵壓不穩(wěn)或流動(dòng)相不能抽取，則可能是單向閥出現(xiàn)問(wèn)題，卸下用異丙醇超聲波清洗，清洗時(shí)須按其安裝的方向放置在小燒杯中，切記不可與安裝方向倒置超洗!

　　4、工作站：出現(xiàn)死機(jī)可重起計(jì)算機(jī);不正常運(yùn)行時(shí)，首先可更換電腦測(cè)試其硬件故障;或在本機(jī)上重新插拔接口、重新安裝軟件。

　　5、過(guò)濾器：當(dāng)色譜峰出現(xiàn)異常情況時(shí)，有可能是此部件被污染，拆下用異丙醇超洗或更換過(guò)濾墊片。

　　6、吸濾頭：特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動(dòng)相通過(guò)吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗;清洗不成功則需要更換。

　　7、流動(dòng)相的抽作要求：高效液相級(jí)色譜醇，二次蒸餾水，緩沖鹽一定要過(guò)濾;流動(dòng)相脫氣至關(guān)重要(可采用抽濾，超聲波脫氣等方法)

　　8、流通池：在色譜峰不正常時(shí)會(huì)可能是此部件補(bǔ)污染。可拆卸后取出其中的墊片用異丙醇超洗(可根據(jù)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作或申請(qǐng)維修)。

　　9、泵頭：泵頭漏液或出現(xiàn)其它故障一般要申請(qǐng)維修(如漏液，或更換柱塞桿及其密封墊等)

　　泵壓不穩(wěn)1、泵頭有氣泡——流動(dòng)相脫氣/大流量沖洗泵/用注射器抽取流動(dòng)動(dòng)相2、單向閥故障——清洗若上述操作仍不能解決，可用異丙醇沖洗流動(dòng)(無(wú)色譜柱沖洗，由手動(dòng)進(jìn)樣器直接進(jìn)檢測(cè)器)，流量為3-4ml/min，沖洗50分鐘左右，然后重新安裝色譜柱，更換流動(dòng)相平衡，如此再不能解決泵壓波動(dòng)故障，可申請(qǐng)更換配件。

　　色譜的保養(yǎng)：漏液處理：C18柱絕對(duì)不能進(jìn)蛋白樣品、血樣，生物樣品。

　　要注意柱子的PH值范圍，不得注射強(qiáng)酸強(qiáng)堿的樣品，特別是堿性樣品。

　　長(zhǎng)時(shí)間不用儀器，應(yīng)該將柱子取上用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應(yīng)該用有機(jī)相(如甲醇)保存，因?yàn)榧兯组L(zhǎng)霉。

　　流路堵塞問(wèn)題：堵塞導(dǎo)致壓力太大，按預(yù)柱→混合器中的過(guò)濾器→管路過(guò)濾器→單向閥檢查，并清洗。清洗方法：①以民丙醇作溶劑沖洗②放在異丙醇中超聲波清洗③用10%稀硝酸清洗緩沖鹽的使用：流動(dòng)相含有鹽分時(shí)，做完實(shí)驗(yàn)后一定要進(jìn)行流路沖洗;首先用水沖洗，打開(kāi)排液閥用PURG鍵轉(zhuǎn)換出原有含鹽的流動(dòng)相，然后關(guān)閉排液閥打開(kāi)泵沖洗全部流路45分鐘以上，如此更換流動(dòng)相為水和甲醇混合液沖洗全部流路30分鐘(此步驟一般可省去，根據(jù)實(shí)驗(yàn)而論)，最后更換純甲醇沖洗全部流路45分鐘以上。

　　泵頭沖洗;用備件中的針頭和針管分別用蒸餾水和純甲醇沖洗3-5ml。

　　如流動(dòng)相不含鹽，可對(duì)機(jī)器定期進(jìn)行簡(jiǎn)單的沖洗維護(hù)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)多少而定。

　　手動(dòng)進(jìn)樣器沖洗;同樣用備件中的針管和專用沖洗針頭對(duì)手動(dòng)進(jìn)樣器的裝載狀態(tài)和進(jìn)樣狀態(tài)分別進(jìn)行沖洗3-4ml的蒸餾水，然后再?zèng)_洗3-4ml的純甲醇。確保每次做完實(shí)驗(yàn)，所有流路中充滿純甲醇!