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生物實驗中試劑的作用及實驗方法總結

[2012/12/14]

  一、化學物質(zhì)的檢測方法

 、俚矸邸庖 (藍色)

 、谶原性糖——斐林試劑\班氏試劑(磚紅色)

 、跜O2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水變渾濁)

 、苋樗帷猵H試紙

  ⑤O2——余燼復然

 、薜鞍踪|(zhì)——被蛋白酶水解 、雙縮脲試劑(紫紅色)

  ⑦脂肪——蘇丹Ⅲ染液 (橘黃色)、蘇丹Ⅳ染液 (紅色)

  ⑧DNA——二苯胺(藍色)

 、崛旧w——龍膽紫溶液,醋酸洋紅溶液

  二、實驗條件的控制方法

  1、加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物

  2、減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水

  3、除去容器中CO2——NaOH溶液

  4、除去葉中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境

  5、除去葉中葉綠素——酒精水浴加熱

  6、除去光合對呼吸干擾——給植株遮光

  7、如何得到單色光——棱鏡色散或透明薄膜濾光

  8、血液抗疑——加入檸檬酸鈉

  9、線粒體提取——細胞勻漿離心

  10、骨無機鹽的除去——鹽酸溶液

  11、滅菌方法——培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌;接種環(huán)用火焰灼燒滅菌;雙手用肥皂冼凈,擦干后用75%酒精消毒;實驗室或接種箱用甲醛蒸汽或紫外燈滅菌;整個過程都在實驗室無菌區(qū)或酒精燈旁進行。

  三、實驗結果的顯示方法

 、俟夂纤俣取狾2釋放量或CO2吸收量或有機物生成量

  ◆水生植物可依氣泡的產(chǎn)生量或產(chǎn)生速率;

  ◆離體葉片若事先沉入水底可依單位時間內(nèi)上浮的葉片數(shù)目;

  ◆植物體上的葉片可依指示劑(如碘液)處理后葉片顏色深淺。

 、诤粑俣取狾2吸收量或CO2釋放量或有機物消耗量

  ③原子或分子轉(zhuǎn)移途徑——放射性同位素示蹤

  ④細胞液濃度大小——質(zhì)壁分離

 、葜参锛毎欠袼劳觥|(zhì)壁分離

  ⑥甲狀腺激素—動物耗氧量,發(fā)育速度等

  ⑦生長激素—生長速度(體重、體長變化)

  ⑧胰島素作用—動物活動狀態(tài)

 、峋俊鋽(shù),亞甲基藍褪色程度

  四、實驗中控制溫度的方法

  1、還原糖,DNA鑒定——沸水浴加熱

  2、酶促反應——水浴保溫

  3、用酒精溶解葉中的葉綠素——酒精要隔水加熱、

  4、細胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)——恒溫箱培養(yǎng)

  五、實驗中常用器材和藥品的使用

  1、NaOH:用于吸收CO2或改變?nèi)芤旱膒H

  2、Ca(OH)2:鑒定CO2

  3、CaCl2提高細菌細胞壁的通透性

  4、HCl:解離或改變?nèi)芤旱膒H

  5、NaHCO3:提供CO2

  6、NaCl:配制生理鹽水或用于提取DNA

  7、瓊脂:激素或其他物質(zhì)的載體或培養(yǎng)基的凝固劑

  8、亞甲基藍:用于檢測污水的細菌含量

  9、酒精:用于消毒、提純DNA、葉片脫色及配制解離液

  10、蔗糖:測定植物細胞液濃度或觀察質(zhì)壁分離和復原、作為碳源和能源物質(zhì)

  11、濾紙:過濾或紙層析

  12、紗布、尼龍布:過濾,遮光

  13、龍膽紫溶液或醋酸洋紅:堿性染料,用于染色體染色

  14、檸檬酸鈉——血液抗凝劑

  六、一些常見的實驗方法

 、拧⒏鶕(jù)顏色來確定某種物質(zhì)的存在:

  淀粉 I2(藍色);還原性糖 斐林試劑(磚紅色);脂肪 蘇丹Ⅲ(橘黃)或 蘇丹Ⅳ(紅色);蛋白質(zhì) 雙縮脲試劑(紫色);

  大腸桿菌 伊紅和美藍(菌落為深紫色,有金屬光澤)

 、、用顏色標記法來確定原腸胚三個胚層的分化情況。

 、、用熒光標記法來證明細胞膜具有一定的流動性

  ⑷、同位素示蹤法:光合作用產(chǎn)生氧氣的來源; 光合作用中二氧化碳的去向; 噬菌體侵染細菌實驗證明DNA是遺傳物質(zhì),蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì); DNA的復制是半保留復制。

 、伞⒋_定某種元素為植物生長必需的元素的方法: 水培法(完全培養(yǎng)液與缺素完全培養(yǎng)液對照)

 、、獲得無籽果實的方法: 用適宜濃度的生長素處理花蕾期已去雄的子房,如無籽蕃茄、 誘導染色體變異,如無籽西瓜。

 、、確定某種激素功能的方法: 飼喂法,切除注射法,閹割移植法,切除口服法。

  ⑻、確定傳入、傳出神經(jīng)的功能: 刺激 觀察效應器的反應或測定神經(jīng)上的電位變化。

  ⑼、植物雜交的方法 雌雄同花:花蕾期去雄 套袋 開花期人工授粉 套袋 雌雄異花:花蕾期雌花套袋 開花期人工授粉 套袋

 、巍⒋_定某一顯性個體基因型的方法: 測交; 該顯性個體自交。

 、、確定某一性狀為顯性性狀或隱性性狀的方法: 具有一對相對性狀的純合體的雜交 自交,觀察后代是否有性狀分離。

  ⑿、確定某一個體是否具有抗性基因的方法: 確定小麥是否具有抗銹病基因,用銹病菌去侵染,一段時間后,觀察有無銹斑出現(xiàn)。

 、选㈣b定血型的方法: 用標準血清與待測血型混合,在顯微鏡下觀察血液的凝集情況。

 、、育種的方法: 雜交育種;人工誘變育種;單倍體育種;基因工程育種;細胞工程育種;多倍體育種等。

 、印y定種群密度的方法:樣方法; 標志重捕法

 、、生態(tài)瓶的制作方法;瓶必須透明,且封閉

 、铡⒎蛛x微生物的方法: 平板劃線法;用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)(如:圓褐固氮菌的分離,金黃色葡萄球菌的分離,細菌和酵母菌的分離)

 、帧y定微生物群體生長的方法:

  測定細菌的數(shù)目---顯微計數(shù)

  測定細菌的重量---取一定體積的培養(yǎng)基,經(jīng)離心分離,反復洗滌后,稱濕重,或烘干后稱干重。

  七、實驗研究方法

  1、顯微觀察法 如觀察植物細胞有絲分裂的實驗,觀察植物細胞質(zhì)壁分離和復原的實驗。

  2、觀察法 觀察微生物的外在性狀和表現(xiàn)等,如觀察注射了甲狀腺激素的小狗的活動狀況,觀察動物的毛色和植物花色的遺傳實驗等。

  3、同位素示蹤法 如噬菌體侵染細菌的實驗,用18O和14C追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉(zhuǎn)移途徑的實驗等。

  4、加法創(chuàng)意 如用飼喂法研究甲狀腺激素的實驗、用注射法研究生長激素的實驗,用移植法研究性激素的實驗等。

  5、減法創(chuàng)意 如用閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素、生長激素的實驗,雌蕊授粉后除去發(fā)育著的種子實驗等。

  6、雜交實驗法 如孟德爾發(fā)現(xiàn)遺傳定律的植物雜交、測交的實驗,小麥的雜交實驗等。

  7、化學分析法 如番茄和水稻對Ca 和Si選擇吸收的實驗,葉綠體中色素的提取和分離實驗等。

  8、理論分析法 如大小草履蟲競爭的實驗,植物根向地生長、莖背地生長的實驗,植物向光性的實驗等。

  9、模擬實驗法 如滲透作用的實驗裝置,分離定律的模擬實驗等。

  八、實驗技術

  1、光學顯微鏡的使用

  適用于觀察生物的微觀結構,如細胞的結構,包括光鏡下可看到的各種細胞器。

  2、臨時裝片、切片和涂片的制作技術

  適用于顯微觀察,凡需在顯微鏡下觀察的生物材料,必須先制成臨時裝片、切片或涂片。如“觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原的實驗”中要制作洋蔥表皮的臨時裝片,在生物組織中脂肪的鑒定中要制作花生種子的切片等。

  3、研磨和過濾技術

  適用于從生物組織中提取物質(zhì),如酶、色素等。研磨時要先將生物材料切碎,然后加入研磨劑〈常用SiO2〉、提取液及其他必要物質(zhì),充分研磨后,往往要進行過濾,以除去濾渣,所用過濾器具則根據(jù)需要或或根據(jù)試題中提供的器材加以選用,如可用濾紙、紗布、脫脂棉、尼龍布等。

  4、解離技術

  用于破壞細胞壁,分散植物細胞,制作臨時裝片。

  5、恒溫技術

  適用于有酶參加的生化反應,一般用水浴或恒溫箱。根據(jù)題目要求選用。

  6、紙層析技術

  適用于溶液中物質(zhì)分離。重要步驟包括制備濾紙條、畫濾液細線、層析分離。

  7、根尖培養(yǎng)技術 觀察植物根尖有絲分裂的實驗

  8、溶液培養(yǎng)法 探究植物必需的礦質(zhì)元素的實驗,〈拓展——微生物生長因子的判斷的實驗〉;植物的無土栽培〈注意溶液濃度和溶解氧〉。