離子色譜法自1975年問(wèn)世以來(lái)發(fā)展迅速，已經(jīng)在環(huán)境監(jiān)測(cè)、電力、半導(dǎo)體工業(yè)、食品、石油化工、醫(yī)療衛(wèi)生和生化等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，已有數(shù)十項(xiàng)成為有關(guān)權(quán)威機(jī)構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)方法。鑒于糖類(lèi)化合物分子具有電化學(xué)活性及在強(qiáng)堿溶液中呈離子化狀態(tài)，roxklin等于1983年首先報(bào)道了用陰離子交換色譜柱分離，脈沖安培檢測(cè)器測(cè)定糖的新方法(簡(jiǎn)稱(chēng)hpaec)。

　　用離子色譜法檢測(cè)糖類(lèi)，尋求操作簡(jiǎn)單，結(jié)果準(zhǔn)確的檢測(cè)體系，值得每一位分析化學(xué)學(xué)者進(jìn)行深入研究。

　　本文包括兩個(gè)部分。

　　第一部分是文獻(xiàn)綜述，這部分結(jié)合多糖的利用價(jià)值及提取方法，評(píng)述了近十年離子色譜檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展以及其它相關(guān)領(lǐng)域在多糖類(lèi)物質(zhì)檢測(cè)中的研究和應(yīng)用。

　　第二部分是研究報(bào)告。首先研究了綠茶中茶葉多糖的最佳提取方法和離子色譜檢測(cè)茶葉多糖中的2種單糖的技術(shù)，在建立了高效，便捷的分析方法的同時(shí)選擇了最佳的提取條件。利用溫水浸提綠茶茶葉，超聲輔助乙酸水解綠茶粗多糖，以metrosepcarb1(150×4.0mm)陰離子交換柱為分離柱，以6.0mmol/lnaoh溶液為洗脫液，在32℃的條件下對(duì)綠茶粗多糖水解液進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)綠茶粗多糖中的葡萄糖和甘露糖兩種單糖的完全分離和定量檢測(cè)。

　　在此研究基礎(chǔ)上，對(duì)其他不同種類(lèi)茶葉多糖進(jìn)行了分析研究，進(jìn)一步優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，由對(duì)單純兩種單糖的分析拓展到同時(shí)分析檢測(cè)四種單糖，取得了良好的試驗(yàn)效果，并且打破了多種單糖需要進(jìn)行梯度淋洗才可實(shí)現(xiàn)分離的復(fù)雜方法，實(shí)現(xiàn)了固定濃度淋洗液直接分離多種單糖的高效方法。

　　基于此，將該法的應(yīng)用延伸到真菌類(lèi)和中藥領(lǐng)域，分別檢測(cè)了香菇多糖和山藥多糖，取得了良好的實(shí)驗(yàn)效果;從而進(jìn)一步驗(yàn)證了該方法的應(yīng)用價(jià)值。但在以上研究過(guò)程中，存在著對(duì)多糖水解液果糖檢測(cè)方面的不足，突出表現(xiàn)為靈敏度低、分析時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等缺點(diǎn)。為了完善檢測(cè)方法，繼續(xù)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，對(duì)果糖的檢測(cè)方法進(jìn)行改進(jìn)，建立快速、高效檢測(cè)多糖中的果糖的離子色譜檢測(cè)方法，實(shí)驗(yàn)取得了很好的效果，得到了高的靈敏度和準(zhǔn)確度，以及低的檢測(cè)限。

　　一.綠茶中茶多糖的提取與離子色譜檢測(cè)方法研究本文在不同浸提條件下提取綠茶粗多糖的基礎(chǔ)上，建立了用高效陰離子交換分離一脈沖安培檢測(cè)(hpae—pad)，在32℃的條件下分離測(cè)定綠茶茶葉多糖中的葡萄糖和甘露糖2種單糖的分析方法。以metrosepcarb1(150×4.0mm)陰離子交換柱為分離柱，6.0mmol/lnaoh溶液為淋洗液，淋洗液流速為1.0ml/min，總分析時(shí)間為35min。在優(yōu)化的分離條件下，葡萄糖和甘露糖的檢出限分別為0.125mg/l和2.0mg/l(進(jìn)樣體積20μl，峰高定量)。用20mg/l葡萄糖和甘露糖的混標(biāo)溶液連續(xù)7次進(jìn)樣，兩種單糖峰高的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為5.79%和14.15%，保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為2.08%和2.19%。樣品測(cè)定的回收率為94.9%-97.5%。用所建立的方法快速、有效分離了綠茶茶葉多糖中的葡萄糖和甘露糖，同時(shí)確定了茶葉多糖的最佳提取條件。

　　二.離子色譜法測(cè)定各種茶葉中的茶多糖研究建立了用高效陰離子交換分離—脈沖安培檢測(cè)分離測(cè)定不同種茶葉多糖中的半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖的分析方法。以metrosepcarb1(150x4.0mm)陰離子交換柱為分離柱，以6.0mmol/l—naoh溶液為淋洗液在32℃的條件下將4種單糖從分離柱上洗脫，淋洗液流速為1.0ml/min，總分析時(shí)間為45min。在優(yōu)化的分離條件下4種單糖的檢出限為0.125mg/l～2.0mg/l(進(jìn)樣體積20μl，峰高定量)。用20mg/l的半乳糖、葡萄糖、甘露糖和30mg/l的果糖混標(biāo)溶液連續(xù)7次進(jìn)樣，峰高的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.82%～14.19%，保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.03%～2.26%。樣品測(cè)定的回收率為91.8%～99.3%。用所建立的方法快速、有效分析了4種常見(jiàn)茶葉多糖，得到了滿(mǎn)意的檢測(cè)結(jié)果。

　　三.香菇多糖和山藥多糖的離子色譜檢測(cè)方法研究建立了離子色譜法分離測(cè)定香菇多糖和山藥多糖的分析方法。以metrosepcarb1(150×4.0mm)陰離子交換柱為分離柱，脈沖安培檢測(cè)，以7.0mmol/lnaoh溶液為淋洗液，淋洗液流速1.0ml/min，總分析時(shí)間為35min。在優(yōu)化的分析條件下，3種單糖的檢測(cè)限分別為半乳糖0.125mg/l，葡萄糖0.5mg/l，甘露糖1.0mg/l(進(jìn)樣體積20μl，峰高定量)，用30mg/l的標(biāo)準(zhǔn)樣品混合溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，峰高的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.79%～3.52%，保留時(shí)間的rsd為3.07%～3.29%，樣品測(cè)定的回收率為96.3%～99.5%。

　　運(yùn)用上述方法分離檢測(cè)香菇多糖和山藥多糖，得到了良好的分離效果和較高的檢測(cè)靈敏度，分析結(jié)果令人滿(mǎn)意。四.離子色譜法檢測(cè)多糖水解液中果糖的研究建立了陰離子交換分離—脈沖安培檢測(cè)分析檢測(cè)多糖水解液中的果糖的離子色譜方法，并且分別討論了峰高和峰面積兩種不同分析定量方法的準(zhǔn)確度。用metrosepcarb1(150×4.0mm)陰離子交換柱為分離柱，以100mmol/lnaoh溶液為淋洗液，流速為1.0ml/min，總分析時(shí)間為13min。在優(yōu)化的色譜條件下，果糖的最低檢出限為0.4mg/l(進(jìn)樣體積20μl)。用10mg/l果糖標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣7次，峰高的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.64%。峰面積的rsd為3.43%，保留時(shí)間的rsd為0.36%。樣品的加標(biāo)回收率為94.6%～96.1%(峰高定量)和93.2%～95.6(峰面積定量)。用所建立的方法快速、準(zhǔn)確的分析了三種茶葉多糖水解液，分析結(jié)果令人滿(mǎn)意。