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微生物培養(yǎng)基的配制原則性

[2013/8/16]

  配制培養(yǎng)基首先要明確培養(yǎng)目的,要培養(yǎng)什么微生物?是為了得到菌體還是代謝產(chǎn)物?是用于實(shí)驗(yàn)室還是發(fā)酵生產(chǎn)?根據(jù)不同的目的,配制不同的培養(yǎng)基。

  培養(yǎng)細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌所需要的培養(yǎng)基是不同的。在實(shí)驗(yàn)室中常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)異養(yǎng)細(xì)菌,培養(yǎng)特殊類型的微生物還需特殊的培養(yǎng)基。

  自養(yǎng)型微生物有較強(qiáng)的合成能力,所以培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物培養(yǎng)基完全由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成。異養(yǎng)型微生物的合成能力較弱,所以培養(yǎng)基中至少要有一種有機(jī)物,通常是葡萄糖。有的異養(yǎng)型微生物需要多種生長(zhǎng)因子,因此常采用天然有機(jī)物為其提供所需的生長(zhǎng)因子。

  如果為了獲得菌體或作種子培養(yǎng)基用,一般來(lái)說(shuō),培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分宜豐富些,特別是氮源含量應(yīng)高些,以利于微生物的生長(zhǎng)與繁殖。如果為了獲得代謝產(chǎn)物或用作發(fā)酵培養(yǎng)基,則所含氮源宜低些,以使微生物生長(zhǎng)不致過(guò)旺而有利于代謝產(chǎn)物的積累。在有些代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)中還要加入作為它們組成部分的元素或前體物質(zhì),如生產(chǎn)維生素B12時(shí)要加入鈷鹽,在金霉素生產(chǎn)中要加入氯化物,生產(chǎn)芐青霉素時(shí)要加入其前體物質(zhì)苯乙酸。

  營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)

  培養(yǎng)基應(yīng)含有維持微生物最適生長(zhǎng)所必須的一切營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。但更為重要的是,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比要合適。

  營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過(guò)低不能滿足其生長(zhǎng)的需要;過(guò)高又抑制其生長(zhǎng)。例如,適量的蔗糖是異養(yǎng)型微生物的良好碳源和能源,但高濃度的蔗糖則抑制微生物生長(zhǎng)。金屬離子是微生物生長(zhǎng)所不可缺少的礦質(zhì)養(yǎng)分,但濃度過(guò)大,特別是重金屬離子,反而抑制其生長(zhǎng),甚至產(chǎn)生殺菌作用。

  各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的配比,特別是碳氮比(C/N比)直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝產(chǎn)物的積累。C/N比一般指培養(yǎng)基中元素碳和元素氮的比值,有時(shí)也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白的含量之比。不同的微生物要求不同的C/N比。如細(xì)菌和酵母菌培養(yǎng)基中的C/N比約為5/1,霉菌培養(yǎng)基中的C/N比約為10/l。在微生物發(fā)酵生產(chǎn)中,C/N比直接影響發(fā)酵產(chǎn)量,如谷氨酸發(fā)酵中需要較多的氮作為合成谷氨酸的氮源,若培養(yǎng)基C/N比為4/1,則菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;若培養(yǎng)基C/N比為3/1,則菌體繁殖受抑制,谷氨酸產(chǎn)量增加。

  此外,還須注意培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽的量以及它們之間的平衡;生長(zhǎng)因子的添加也要注意比例適當(dāng),以保證微生物對(duì)各生長(zhǎng)因子的平衡吸收。