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抗體抗原相關(guān)實驗操作知識

[2013/8/26]

  抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清,一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。高效價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。

  一種抗原能否引起抗體生成反應(yīng),一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇(Antigenic determinant),另一方面取決于機體的免疫狀態(tài),當(dāng)具備以上兩個條件后,抗體生成將遵循抗體生成的一般規(guī)律——初次反應(yīng)和再次反應(yīng)。

  抗原的種類繁多,包括天然的蛋白質(zhì)抗原和細(xì)胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等,不同的抗原免疫動物具有不同的特殊性。一般完全抗原免疫動物需加用佐劑,尤其在使用可溶性抗原時,以期得到高效價的抗血清;合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物質(zhì)需先通過人工的方法與蛋白質(zhì)載體連接后再與佐劑混合免疫動物,方可獲得理想的免疫效果。使用佐劑后可增加抗原的免疫原性和延長抗原在機體內(nèi)存留的時間,從而改變了抗原原有的免疫原性。

  抗血清效價一般以抗血清稀釋倍數(shù)表示。血清效價的檢測方法很多,靈敏度各不同,因此在表示抗血清效價時,應(yīng)標(biāo)明檢測方法。另外,在沉淀反應(yīng)中,出現(xiàn)沉淀時的抗原、抗體比例有一較大的范圍,如用不同濃度的抗原測定效價時,結(jié)果會因此有別

  一般而言,抗原的純度不很重要,特別是免疫原性較強的抗原。

  免疫程序、劑量和方法是關(guān)系到是否能得到所需要的單克隆抗體的關(guān)鍵之一。一只正常的小白鼠的脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤融合,只能有千萬分之一的機會獲得某一種特定抗體。