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熒光顯微鏡記錄熒光圖像的方法

[2013/8/31]

  熒光顯微鏡所觀察到的熒光圖像,一是具有形態(tài)學(xué)特征,二是具有熒光的顏色和亮度,在判斷結(jié)果時(shí),必須將二者結(jié)合起來(lái)綜合判斷。結(jié)果記錄根據(jù)主觀指標(biāo),即憑工作者目力觀察,作為一般定性觀察基本上是可靠的。

  隨著技術(shù)科學(xué)的發(fā)展,采用細(xì)胞分光光度計(jì)、流式細(xì)胞儀、激光共聚焦顯微鏡和圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結(jié)果,也必須結(jié)合主觀的判斷。

  熒光顯微鏡攝影技術(shù)對(duì)于記錄熒光圖像十分必要,由于熒光很易減弱褪色,要及時(shí)攝影記錄結(jié)果。方法與普通顯微鏡攝影技術(shù)基本相同。只是需要采用高速感光膠片如ASA400以上或感光度27以上。

  因紫外光對(duì)熒光猝滅作用大,如FTTC的標(biāo)記物,在紫外光下照射30s,熒光亮度降低50%。所以曝光速度太慢,就不能將熒光圖像拍攝下來(lái)。一般研究型熒光顯微鏡都有半自動(dòng)或全自動(dòng)顯微鏡攝影系統(tǒng)裝置,或用CCD與計(jì)算機(jī)連接,將圖像存在計(jì)算機(jī)硬盤(pán)上。