正確的微生物學(xué)檢驗(yàn)始自正確的標(biāo)本采取。微生物學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化首先應(yīng)從標(biāo)本采取與處理的規(guī)范化開始。正確的采取、處理與運(yùn)送細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本是臨床細(xì)菌檢驗(yàn)成功的關(guān)鍵。

　　一、血液細(xì)菌培養(yǎng)

　　臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血流感染的患者，需做血液細(xì)菌培養(yǎng)以明確病原。及時(shí)、準(zhǔn)確地從患者血液中分離出病原菌，才能進(jìn)行有效的抗菌治療，提高治愈率和降低醫(yī)療費(fèi)用。

　　1、采血時(shí)機(jī)：應(yīng)在用抗菌素治療前，最好在患者發(fā)冷發(fā)熱前半小時(shí)采血為宜。

　　2、采血次數(shù)與間隔

　　(1)急性感染患者：從兩臂分別采2份血樣。

　　(2)感染性心內(nèi)膜炎患者：24h內(nèi)采血3次，每次間隔不少于30分鐘。

　　(3)發(fā)熱原因不明患者：24~48h后可再采血2次,間隔不少于60分鐘。

　　3、采血部位：多次采血時(shí)，應(yīng)在不同部位進(jìn)行。

　　4、采血量：成年人采血量為10ml，新生兒與嬰幼兒為1~2ml。每增加1ml血量平均提高陽(yáng)性率3.2%。

　　5、抗凝劑：0.025~0.05%聚茴香腦磺酸鈉(sodium polyanethol sulfonate，SPS)。SPS具有抗凝抗吞噬抗補(bǔ)體及拮抗某些抗生素的作用。

　　6、培養(yǎng)條件：視患者的感染、用藥情況選用不同的培養(yǎng)瓶。

　　二、胸腹水及腦脊液標(biāo)本

　　1、采集：以無(wú)菌手續(xù)穿刺抽取，為防止凝固可直接注入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。

　　2、運(yùn)送：用帶蓋的無(wú)菌容器送檢。

　　3、培養(yǎng)：接種前應(yīng)離心或做增菌培養(yǎng)。

　　三、尿液標(biāo)本

　　1、標(biāo)本采集：應(yīng)在用藥前或停藥5天后留取標(biāo)本，并使尿液在膀胱內(nèi)停留6-8h以上(給細(xì)菌足夠的繁殖時(shí)間)。

　　(1)清潔排尿法：沖洗尿道口后用無(wú)菌容器留取中段尿送檢。

　　(2)膀胱穿刺法：此法是收集尿液的最好方法，尤其對(duì)厭氧菌檢查。

　　(3)腎盂尿采集法：應(yīng)請(qǐng)泌尿科醫(yī)生采取，左右側(cè)的標(biāo)本要標(biāo)記明確。

　　(4)留置導(dǎo)管取尿法：應(yīng)穿刺導(dǎo)尿管壁抽取尿液。

　　結(jié)核分枝桿菌的檢查，應(yīng)留取24小時(shí)尿;檢測(cè)衣原體時(shí)，尿液標(biāo)本不能代替尿(陰)道分泌物;巨細(xì)胞病毒的檢測(cè)，需多次檢測(cè)標(biāo)本，因其釋放是周期性的。

　　2、標(biāo)本的運(yùn)送和保存：用無(wú)菌帶螺帽的容器盛標(biāo)本，標(biāo)本應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)送檢。

　　四、痰標(biāo)本：標(biāo)本留取質(zhì)量的好壞直接影響到對(duì)下呼吸道病原學(xué)的診斷，導(dǎo)致抗菌治療失敗,以及造成耐藥菌的出現(xiàn)。

　　1、標(biāo)本采集：應(yīng)在用藥前或停藥1天后留取標(biāo)本。

　　(1)自然咳痰：要求患者留痰前用清水漱口3次，用力咳出。首先用滅菌生理鹽水將痰液洗3次，然后將痰塊打碎，制成懸液后再接種。

　　(2)氣管穿刺法：適用于昏迷患者。

　　(3)纖維支氣管鏡抽取法：適用于纖維支氣管鏡檢查或治療的患者。

　　(4)胃液抽取法：適用于嬰幼兒患者。

　　五、咽拭子

　　1、拭子的選擇：要求無(wú)菌、不含抑制劑;

　　2、預(yù)先沾濕拭子;

　　3、直取感染部位，減少污染。

　　六、生殖道標(biāo)本

　　1、男性患者：

　　(1)尿道標(biāo)本：清洗龜頭,用碘伏等消毒后,擠出分泌物或以專用細(xì)拭子插入尿道口旋轉(zhuǎn)采取分泌物送檢。

　　(2)前列腺標(biāo)本：應(yīng)由醫(yī)師按摩前列腺,以無(wú)菌手續(xù)自尿道口采取前列腺液送檢。

　　2、女性患者：(1)成年患者：應(yīng)在擴(kuò)陰器的支持下，以無(wú)菌棉拭子取分泌物送檢。

　　(2)未成年患者：不應(yīng)使用擴(kuò)陰器，應(yīng)以無(wú)菌拭子在陰道口處采取分泌物送檢。

　　七、厭氧菌檢查

　　厭氧菌是人體許多部位(如皮膚、口咽部、腸道和泌尿生殖道)正常菌群中的一部分，因此下列材料無(wú)需做厭氧菌培養(yǎng)：(1)咽、鼻、尿道或直腸拭子。(2)咳出的痰，通過支氣管鏡取的分泌物，排出或?qū)С龅哪�、糞及胃內(nèi)容物。

　　1、正確地選擇標(biāo)本：為排除或盡量減少正常菌群中厭氧菌的污染，用注射器抽取標(biāo)本比用拭子更好，特別適用于下列臨床情況：

　　(1)從未開放的膿腫抽取膿液。

　　(2)通過胸腔穿刺抽出的胸腔液。

　　(3)從恥骨聯(lián)合上方做膀胱穿刺吸出或從腎造口管收集的尿。

　　(4)氣管切開吸取的肺分泌物。

　　(5)穿刺抽出的腹腔液。

　　(6)通過腰椎穿刺抽出的腦脊液。

　　(7)竇道標(biāo)本可插入小導(dǎo)管用注射器吸出，注射器和針頭內(nèi)的氣體應(yīng)全部排出，將其內(nèi)容物直接注入一個(gè)已排出氣的無(wú)菌試管內(nèi)。也可自竇道損傷部位取材做活組織檢查。如果必須使用拭子，應(yīng)盡快接種于適宜的培養(yǎng)基中。

　　2、正確地運(yùn)送厭氧菌標(biāo)本：臨床標(biāo)本一旦離開人體部位，在進(jìn)入?yún)捬醐h(huán)境前，必須防止大氣中氧的毒性作用。應(yīng)及時(shí)將取材的拭子、塑料導(dǎo)管內(nèi)的少量液體、吸入注射器的標(biāo)本裝入?yún)捬跎锎蚬�，在運(yùn)送過程中要保持厭氧狀態(tài)。培養(yǎng)基內(nèi)不應(yīng)含有肝素，因它會(huì)抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。

　　八、腦膜炎奈瑟菌的檢查

　　根據(jù)病期不同，采集的標(biāo)本也有所不同。菌血癥期病人可采取血液;出現(xiàn)出血點(diǎn)或瘀斑者，可挑取瘀斑滲出液;如出現(xiàn)腦脊髓膜刺激癥狀者，必要時(shí)可抽取腦脊液;上呼吸道感染期的疑似病人和帶菌者，可取鼻咽腔分泌物進(jìn)行檢查。因該菌易自溶，故應(yīng)立即送檢，最好在床邊接種。

　　九、支原體及衣原體檢查

　　支原體和衣原體主要在人的泌尿生殖道的上皮細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)該以專用棉拭子采取標(biāo)本。尿標(biāo)本應(yīng)離心取沉淀。

　　十、糞便標(biāo)本

　　1、標(biāo)本采集：應(yīng)在發(fā)病早期并且盡量在用抗生素治療前采集，稀便不少于1ml，固體便不少于1克，無(wú)便患者可用直腸拭子采集標(biāo)本。

　　2、顯微鏡檢查：糞便直接涂片革蘭染色，可作為艱難梭菌、弧菌、彎曲菌、葡萄球菌、念珠菌等的初步篩查，更能作為菌群失調(diào)的直觀判斷。