通常，一根色譜柱在分析數(shù)千個(gè)樣品之后性能仍然保持良好，但也有的色譜柱僅分析不多的樣品后幾乎就報(bào)廢了。影響色譜柱壽命和其它問(wèn)題的因素很多，而有些因素是操作者很難控制的，如果被分析的樣品(如分析生物樣品)，怎么凈化樣品也是“臟"的，對(duì)于色譜柱的影響是非常大的。然而采取下列措施后，在多數(shù)情況下總能夠人為地減少色譜柱上故障，達(dá)到延長(zhǎng)壽命的目的。

色譜柱預(yù)防及維護(hù)—避免高壓沖擊  

一般色譜柱都能經(jīng)得起高壓，但經(jīng)不起突然變化的高壓沖擊。引起高壓突然沖擊，主要是因樣品閥的緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)、泵起動(dòng)快、柱切換操作等。轉(zhuǎn)動(dòng)六通進(jìn)樣閥時(shí)從泵到柱的液流會(huì)瞬時(shí)切斷。在閥的泵側(cè)壓力升高，在閥的柱側(cè)壓力降低(變化超過(guò)20%)。閥轉(zhuǎn)到底后壓力突然沖擊一下恢復(fù)正常。手動(dòng)進(jìn)樣閥的變化不大，自動(dòng)進(jìn)樣閥比較慢，可能造成壓力沖擊，可用氦氣代替空氣驅(qū)動(dòng)進(jìn)樣閥。因氮壓縮系數(shù)小。另外泵起動(dòng)不應(yīng)過(guò)快，可分步操作。如用3mL/min流速，先從lmL/min到2mL/min，然后再3mL/min，每個(gè)間隔應(yīng)大于20s。柱切換技術(shù)的應(yīng)用也很廣泛，切換過(guò)程中在色譜柱的入口處壓力在零到很大數(shù)字之間變化，會(huì)很快使柱報(bào)廢。

色譜柱預(yù)防及維護(hù)—分離條件  

多數(shù)色譜柱有很寬的試驗(yàn)條件范圍，但具體應(yīng)用又受到限制，主要是pH值、柱溫和流動(dòng)相的選擇。硅膠為基質(zhì)的鍵合相要求PH在2.5～7之間，極端pH的流動(dòng)相能“溶解"硅膠，使鍵合相流失。結(jié)果非堿性組分的保留不斷減少，堿性組分的保留增加，引起堿性組分峰變寬。如果一定要用高或低pH的流動(dòng)相，可加預(yù)柱(飽和柱)。預(yù)柱裝在泵和進(jìn)樣閥之間，用分析柱相同的填料填裝，或者用普通硅膠。硅膠飽和了流動(dòng)相，減少了分析柱填料的損失。預(yù)柱不要求柱效高，用價(jià)格低的一般硅膠疏松地填裝，按期檢查硅膠的溶解情況。用預(yù)柱也有不利的影響，即新流動(dòng)相難以平衡，保留時(shí)間不穩(wěn)定或穩(wěn)定慢。使用了預(yù)柱一定要加流路過(guò)濾器，以防止硅膠微粒引起的麻煩。以硅膠為基質(zhì)的柱和陰離子交換柱超過(guò)60℃后，會(huì)增加對(duì)流動(dòng)相中化學(xué)物質(zhì)的吸附。在高溫下用小顆粒柱引起柱床塌陷，降低柱效，改變峰形。在40℃以上使用3μm柱，70℃以上使用5μm柱，會(huì)使值降低50%。

色譜柱預(yù)防及維護(hù)—加流路過(guò)濾器和保護(hù)柱  

流路過(guò)濾器緊靠進(jìn)樣閥后面，位于分析柱前。0.5μm燒結(jié)不銹鋼片夾在死體積很小的套子中，擋住來(lái)源于樣品和進(jìn)樣閥墊圈的微粒入柱。因?yàn)槊總�(gè)樣品都過(guò)濾既費(fèi)事又帶來(lái)誤差，樣品量少過(guò)濾更困難，因此流路上裝過(guò)濾器是比較省事的辦法。也可以在流路加上保護(hù)柱，放在流路過(guò)濾器和分析柱之間，或者代替流路過(guò)濾器。保護(hù)柱的使命是收集阻塞色譜柱進(jìn)口的來(lái)自樣品的化學(xué)“垃圾"。這種垃圾最終降低柱效能。保護(hù)柱是消耗品，分析50～100個(gè)比較臟的樣品之后就要調(diào)換新的。保護(hù)柱應(yīng)該是小體積，用分析柱的同種填料填裝。保護(hù)柱使用得當(dāng)，對(duì)分離無(wú)影響，好像未裝保護(hù)柱一樣。有些廠商的商品將保護(hù)柱和流路過(guò)濾器連在一個(gè)單元內(nèi)，使用起來(lái)非常方便。自己填裝保護(hù)柱都是用短柱、不超過(guò)3cm長(zhǎng)，內(nèi)徑2～3mm，用較大粒度的填粒(15～20μm)干法填裝，會(huì)使分析柱效略微有所降低。

色譜柱預(yù)防及維護(hù)—用強(qiáng)溶劑定期沖洗色譜柱   

每次工作結(jié)束，用強(qiáng)溶劑沖洗柱是良好的習(xí)慣�？捎眉状肌⒁译鏇_反相柱，沖去留在柱上的強(qiáng)吸附組分。用甲醇水為流動(dòng)相時(shí)也應(yīng)沖洗。沖洗的程序在以下章節(jié)中介紹。柱頭的燒結(jié)不銹鋼濾片，要求平整，死體積小，孔徑適當(dāng)(2～5μm)。過(guò)濾片選擇不好會(huì)改變色譜峰形，增加阻力或起不到阻擋污染物的作用(填料很快變色)。

色譜柱預(yù)防及維護(hù)—凈化樣品  

用溶劑溶解的樣品，多數(shù)組分在一定的時(shí)間內(nèi)能完全從柱中流出來(lái)，不會(huì)造成危害。有些樣品可能含有微粒物質(zhì)，樣品中的某種組分(如蛋白質(zhì))在柱頭上沉積下來(lái)，組分在固定相上保留很強(qiáng)，溶劑帶走柱填料等，這些都會(huì)造成柱效能下降或?qū)χ鶋勖挠绊�，有必要采取措施防止柱變壞�?/FONT>