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紫外可見分光光度計原理及應用
[2015/5/12]
紫外可見分光光度計法從問世以來,在應用方面有了很大的發(fā)展,尤其是在相關學科發(fā)展的基礎上,促使分光光度計儀器的不斷創(chuàng)新,功能更加齊全,使得光度法的應用更拓寬了范圍。
1.原理
物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸 收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
紫外可見分光光度法的定量分析基礎是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質(zhì)在一定濃度的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比
2 應用
2.1 檢定物質(zhì)
根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是最大吸收波長雖ax和摩爾吸收系數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應用。在國內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。
2.2 與標準物及標準圖譜對照
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應完全一致。如果沒有標樣,也可以和現(xiàn)成的標 準譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準確,精密度高,且測定條件要相同。
2.3 比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性
2.4 純度檢驗
2.5 推測化合物的分子結(jié)構
2.6 氫鍵強度的測定
實驗證明,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不 同溶劑中氫鍵強度,以確定選擇哪一種溶劑 。
2.7 絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定
2.8 反應動力學研究
2.9 在有機分析中的應用
有機分析是一門研究有機化合物的分離、鑒別及組成結(jié)構測定的科學,它是在有機化學和分析化學的基礎上發(fā)展起來的綜合性學科。