色譜分析是以假定給定組分的保留值在分離條件不變時保留值恒定為基礎的。對標準的液相色譜程序而言，每個峰都對應于一個組分，以標準品與樣品中組分的保留時間相對應進行鑒別。恒定的保留時間對分析設計排列的樣品很重要。

在液相色譜儀分析中常涉及到組分的保留值。保留值發(fā)生改變可使已建立的方法不能繼續(xù)進行下去，或引起分析周期太長，或者峰分不開。應該找出引起保留值變化的原因。

液相色譜分析中保留時間改變的原因

除上述條件之外，引起保留變化的原因主要包括下列3種：

1 柱-柱之間；

2 日-日或日內：保留時間可能隨時間而變化，如溫度、柱溫、pH值等對柱性能有影響，通常是所有的峰提前或延遲。

3 樣品-樣品間：偶爾也有樣品與標準品的保留時間不同，可能是樣品介質的影響。

以下重點討論造成日-日間和日內保留時間變化的影響因素，它們主要是：

a 分離條件控制差

除了色譜柱外，保留是溫度、流動相組成和流速的綜合體現(xiàn)，如果有一個條件變化，保留時間也會隨之發(fā)生變化。

b 柱平衡慢

流動相組成或溫度變化時，柱在新條件下再平衡需要一定的時間，在柱達到完全平衡錢不應進樣。

c 柱鈍化

長時間進樣，柱會退化，強保留組分被柱不可逆的保留，導致所有組分保留減少。鍵合相層從填料微粒上剝落下來，會導致某些組分的保留增加，而另一組分的保留減少。

d 柱過載和樣品介質相互作用

過大的樣品量超出柱的線性范圍，使保留減少。也可能是樣品本身過載，從其它方面影響保留。