各國的技術(shù)標準對生物柴油產(chǎn)品中的總甘油含量（鍵合甘油含量+游離甘油含量）和游離甘油含量都作出了限制。其中“鍵合甘油”并不是甘油，而是指生物柴油中甘油三酯、甘油二酯和甘油單酯的總量。

　　甘油和甘油酯是生物柴油生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的主要副產(chǎn)物，在生物柴油燃燒的過程中，它們會沉積在發(fā)動機中，這對發(fā)動機的正常運轉(zhuǎn)是有害的。業(yè)界一致認為，甘油和甘油酯的含量是決定生物柴油品質(zhì)的一個主要因素。同時，通過測定游離甘油和總甘油的含量也能看出原料的反應程度，這對生物柴油制備過程的監(jiān)控意義重大。

　　因為各技術(shù)標準中規(guī)定的甘油類物質(zhì)的含量上限較低，所以人們需要精確而可靠的方法來進行分析測定。通常選用毛細管氣相色譜法來實現(xiàn)。有學者聲稱只有GC能夠滿足測定生物柴油中低含量甘油酯的所有要求。但是在進行測定之前，必須先將標樣的純度用液相色譜儀進行檢測，否則如果標樣物質(zhì)不純，會導致氣相色譜儀的分析結(jié)果不準確。

　　最初人們采用基于酶催化結(jié)合分光光度計的方法來分析生物柴油中的甘油類物質(zhì)。但這種方法比較復雜，可重復性也比較差。

　　1992年，Bondioli等提出了一種GC-FID聯(lián)用的方法，以測定生物柴油中的游離甘油。后來人們又研發(fā)了一種將GC-MS聯(lián)用來對生物柴油中的甘油酯進行定量分析的方法。該法使用一根(5%苯基)-甲基聚硅氧烷柱與質(zhì)譜儀聯(lián)用，能夠得到非常準確的定量分析數(shù)據(jù)。但是在進行分析之前要用N,O-雙（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺（BSTFA）對樣品進行硅烷化。  

　　Mittelbach等提出用GC-MS法也可以測定生物柴油中的游離甘油含量，而且精度高，速度快，還可同時測定生物柴油中的甲醇。

　　1995年Plank等研究出了另一種GC-FID法，可以同時測定生物柴油樣品中的甘油和各種甘油酯。后來，這種方法先后被歐盟的EN14105標準、美國的ASTM6584標準和我國的GB/T20828標準所采用。但是這個方法仍然有其缺陷。

　　2007年Chong等提出了一種測定甘油酯類的新方法，他們先用含氟酸的酸酐將酯類氟化，然后將GC-MS技術(shù)和FT-IR聯(lián)用，測定生物柴油中的甘油酯。這種方法可以減少分析時間和成本。

　　將HPLC和GC聯(lián)用，充分發(fā)揮HPLC的分離優(yōu)勢，也可以測定生物柴油中的游離甘油量和總甘油量。這兩項技術(shù)聯(lián)用可以使GC的色譜圖變得比較簡單，這樣可以在圖上標出更多更可靠的峰。