發(fā)酵前準(zhǔn)備工作
檢查電源是否正常，空壓機(jī)、微機(jī)系統(tǒng)和循環(huán)水系統(tǒng)是否正常工作。

檢查系統(tǒng)上的閥門(mén)、接頭及緊固螺釘是否擰緊。

開(kāi)動(dòng)空壓機(jī)，用0.15Mpa壓力，檢查種子罐、發(fā)酵罐、過(guò)濾器、管路、閥門(mén)等密封性是否良好，有無(wú)泄漏。罐體夾套與罐內(nèi)是否密封（換季時(shí)應(yīng)重點(diǎn)檢測(cè)），確保所有閥門(mén)處于關(guān)閉狀態(tài)（電磁閥前方的閥門(mén)除外）。

檢查水（冷卻水）壓、電壓、氣（汽）壓能否正常供應(yīng)。進(jìn)水壓維持在0.12Mpa，允許在0.15-0.2Mpa范圍變動(dòng)，不能超過(guò)0.3Mpa，溫度應(yīng)低于發(fā)酵溫度10℃；單相電源AC220V±10%，頻率50Hz，罐體可靠接地；輸入蒸汽壓力應(yīng)維持在0.4Mpa，進(jìn)入系統(tǒng)后減壓為0.24MPa；空壓機(jī)壓力值0.8Mpa，空氣進(jìn)入壓力應(yīng)控制在0.25-0.30MP（空氣初級(jí)過(guò)濾器的壓力值）。

溫度、溶氧電極、PH電極校正及標(biāo)定，詳見(jiàn)觸摸屏PH、DO的標(biāo)定幫助。
檢查各電機(jī)能否正常運(yùn)轉(zhuǎn)（共4個(gè)）。電磁閥能否正常吸合（整套系統(tǒng)共11個(gè)電磁閥）。
滅菌
發(fā)酵系統(tǒng)安裝好后的初次清洗
罐內(nèi)的清洗：酸堿罐、補(bǔ)料罐、種子罐可將罐體上方的法蘭卸開(kāi)，由操作工采用潔凈布手動(dòng)清洗，結(jié)束后排盡罐內(nèi)的污水，在多沖洗幾遍即可。發(fā)酵罐的清洗可采用自來(lái)水管通過(guò)手孔向罐體內(nèi)壁沖洗，當(dāng)水位上升到攪拌軸的第二片葉輪時(shí)停止沖洗，開(kāi)動(dòng)電機(jī)攪拌清洗。各管路的清洗，可以先采用清水沖洗，再根據(jù)相應(yīng)功能采用相應(yīng)的清洗介質(zhì)（清洗管路時(shí)應(yīng)以保護(hù)管路中的各種元件為前提），具體步驟可參考“空氣管路的滅菌”。如果發(fā)酵系統(tǒng)長(zhǎng)時(shí)間不用或培養(yǎng)的菌體與上一批次的不相同時(shí)，可采用2%NaOH清洗，其他各罐也可以采用發(fā)酵罐的清洗方式清洗，清洗結(jié)束后應(yīng)對(duì)發(fā)酵系統(tǒng)滅菌。

空氣管路的滅菌

空氣管路上的除菌過(guò)濾器，使用蒸汽通過(guò)減壓閥（空氣減壓閥不能進(jìn)行蒸汽滅菌，所以空氣預(yù)過(guò)濾器不滅菌）、蒸汽過(guò)濾器然后進(jìn)入除菌過(guò)濾器。

空氣除菌過(guò)濾器的濾芯不能承受高溫高壓，因此，將蒸汽減壓閥調(diào)整在0.13MPa，不得超過(guò)0.15MPa。

空消過(guò)程中，除菌過(guò)濾器下端的排氣閥應(yīng)微微開(kāi)啟，排除冷凝水。

空消時(shí)間應(yīng)持續(xù)30分鐘左右，當(dāng)設(shè)備初次使用或長(zhǎng)期不用后啟動(dòng)時(shí)，最好采用間歇空消，即第一次空消后，隔3～5小時(shí)再空消一次，以便消除芽孢。

經(jīng)空消后的過(guò)濾器，應(yīng)通氣吹干，約20～30分鐘，然后將氣路閥門(mén)關(guān)閉。保持空氣管道正壓。

發(fā)酵罐空消（種子罐、補(bǔ)料罐、酸堿罐空消作為參考依據(jù)）

發(fā)酵罐空消前，應(yīng)將打開(kāi)排污閥Q22打開(kāi)（使夾套內(nèi)的壓力不超壓）。

關(guān)閉Q14，微開(kāi)Q15,打開(kāi)蒸汽閥門(mén)Q12，打開(kāi)Q13向罐內(nèi)通蒸汽；打開(kāi)Q18、Q19通過(guò)取樣口向罐內(nèi)通蒸汽。

將罐上的接種口，排氣閥Q9，及排污管路上的閥門(mén)Q24、Q25微微打開(kāi)，使蒸汽通過(guò)這些閥門(mén)排出，當(dāng)濕度達(dá)到1220C后開(kāi)始計(jì)時(shí)，調(diào)整閥門(mén)Q9、Q13、Q19的開(kāi)度，保持罐內(nèi)溫度1220C~1280C（壓為一般在0.11～0.15Mpa），可根據(jù)工藝調(diào)整空消的溫度與壓力。

當(dāng)時(shí)間達(dá)到30～40分鐘后，關(guān)閉Q13、Q15、Q19，然后再關(guān)閉Q12、Q18，打開(kāi)空氣管路上的閥門(mén)Q14、Q13向罐內(nèi)通空氣冷卻，讓罐內(nèi)保持正壓在0.03MPa-0.05MPa之間。

需要快速冷卻時(shí)則關(guān)閉夾套排污閥門(mén)Q22，打開(kāi)冷卻水閥門(mén)Q27/DC1向夾套通水冷卻，到達(dá)常溫后關(guān)閉冷卻水。特殊情況下，可采用間歇空消（隔3～5小時(shí)再空消一次，以便消除芽孢）。

空消時(shí)，溶氧、PH電極取出，妥善保存，以延長(zhǎng)其使用壽命。

發(fā)酵罐實(shí)消（種子罐、補(bǔ)料罐、酸堿罐實(shí)消作為參考依據(jù)）

實(shí)消是當(dāng)罐內(nèi)加入培養(yǎng)基后，用蒸汽對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的過(guò)程。

空消結(jié)束后，關(guān)閉進(jìn)氣閥門(mén)Q13,打開(kāi)Q9卸去罐內(nèi)壓力，將校正好的PH、DO電極裝好，盡快將配好的培養(yǎng)基從加料口加入罐內(nèi)。

培養(yǎng)基在進(jìn)罐之前，應(yīng)先糊化，一般培養(yǎng)基的配方量應(yīng)根據(jù)工藝要求確定，發(fā)酵液的最終容積為罐體全容積的70％左右計(jì)算(泡沫多的培養(yǎng)基為60％左右，泡沫少的培養(yǎng)基可達(dá)75～80％)，考慮到冷凝水和接種量因素，以及是否流加，初定容由生產(chǎn)根據(jù)工藝的要求自行決定，需在實(shí)踐中摸索。

開(kāi)啟機(jī)械攪拌裝置，低速轉(zhuǎn)動(dòng)，使罐內(nèi)物料均勻混合。

打開(kāi)夾套排污閥Q22、蒸汽閥Q21，對(duì)罐內(nèi)培養(yǎng)基預(yù)熱（采用夾套通汽預(yù)加熱）。當(dāng)罐內(nèi)溫度升到90℃時(shí)（具體溫度應(yīng)按蒸汽質(zhì)量而變動(dòng)），關(guān)閉夾套進(jìn)汽閥Q21，關(guān)閉Q14，全打開(kāi)進(jìn)汽閥Q12,打開(kāi)Q13通入蒸汽，全開(kāi)Q18，微開(kāi)Q19通過(guò)取樣口向罐內(nèi)通蒸汽，關(guān)閉Q25、Q26，全開(kāi)Q23,微開(kāi)Q24向罐內(nèi)通蒸汽，微開(kāi)尾氣閥門(mén)Q9（三路通汽滅菌），關(guān)閉電機(jī)攪拌。

當(dāng)溫度升到121—123℃，罐壓升至0.12MPa時(shí)，控制蒸汽閥門(mén)Q9、Q19、Q13、Q24的開(kāi)度，維持溫度與罐壓，并開(kāi)始計(jì)時(shí)，微開(kāi)火焰接種口向外排蒸汽，當(dāng)時(shí)間到達(dá)30分鐘之前，關(guān)緊焰接種口，關(guān)閉Q24（關(guān)閉前應(yīng)人為地開(kāi)大蒸汽量幾次，避免培養(yǎng)基殘留于閥門(mén)處）,關(guān)閉Q23，關(guān)閉Q19、18，關(guān)閉Q13、Q12停止供汽。

關(guān)閉夾套排污閥門(mén)Q22，打開(kāi)冷卻水閥Q27/DC1向夾套通水冷卻，打開(kāi)電機(jī)攪拌，當(dāng)壓力降到0.05MPa時(shí)打開(kāi)空氣閥門(mén)Q14、Q13向罐內(nèi)通空氣，加快冷卻速度，并保持罐壓為0.05MPa，直到罐內(nèi)培養(yǎng)基溫度降至接種溫度。當(dāng)罐內(nèi)溫度降至比發(fā)酵工藝所要求的溫度高2－3℃時(shí)，關(guān)閉閥門(mén)Q27/DC1停止通冷卻水。

種子罐接種、移種

接種：

本系統(tǒng)采用火焰封口接種，接種前應(yīng)事先準(zhǔn)備：酒精棉花、鉗子、鑷子、接種環(huán)、石棉網(wǎng)手套、Z字扳手。

菌種裝入三角燒瓶?jī)?nèi)，接種量根據(jù)工藝要求確定。

將酒精棉花圍在接種環(huán)周?chē)c(diǎn)燃，將菌種瓶口在火焰上燒一會(huì)兒，用Z字扳手?jǐn)Q開(kāi)接種口，迅速將菌種倒入罐內(nèi)，此時(shí)應(yīng)向罐內(nèi)通氣，使接種口有空氣排出（壓力接近與零，但不能為零）。

將接種口蓋在火焰上滅菌后擰緊。接種后，罐壓保持在0.03MPa~0.07MPa，調(diào)節(jié)通風(fēng)量。

移種：

移種前應(yīng)先排空蒸汽管路內(nèi)的冷凝水，排空后保持蒸汽閥微開(kāi)（只流水不排蒸汽）使蒸汽管路內(nèi)的冷凝水隨時(shí)可以排空。

移種操作時(shí)要特別注意調(diào)整種子罐和培養(yǎng)罐之間的壓差，種子罐的壓力應(yīng)當(dāng)高于培養(yǎng)罐0.1MPa才能進(jìn)行移種！移種時(shí)在關(guān)閉蒸汽閥后應(yīng)當(dāng)立即進(jìn)行移種，避免造成負(fù)壓污染。

移種完畢后應(yīng)立即關(guān)閉移種閥，然后打開(kāi)與之聯(lián)通的蒸汽閥通入蒸汽進(jìn)行沖刷消毒，并立即清洗種子罐，防止發(fā)酵料粘結(jié)在管道閥門(mén)及罐壁上，消毒后立即關(guān)閉蒸汽閥門(mén)和排冷凝水的閥門(mén)及管帽。

取樣

在接種完成后或在發(fā)酵中途要取樣檢查時(shí)，可通過(guò)取樣口取樣。取樣前，取樣管路閥門(mén)需用蒸汽滅菌，防止雜菌污染而引起誤導(dǎo)，取樣結(jié)束后同樣要用蒸汽沖洗取樣管道及閥門(mén)。

操作方法：全開(kāi)蒸汽閥門(mén)Q18，微開(kāi)Q20，當(dāng)時(shí)間到15分鐘后，將酒精棉花圍在取樣口周?chē)c(diǎn)燃，關(guān)閉Q20，關(guān)閉Q18，打開(kāi)Q19，打開(kāi)Q20，先將取樣管內(nèi)的液體排光后，將準(zhǔn)備好的取樣瓶在火焰邊打開(kāi)，快速取樣并蓋好，關(guān)閉Q20，然后打開(kāi)Q18清洗/滅菌取樣口5分鐘，關(guān)閉Q20、Q18。取樣完成后，要用PH儀檢測(cè)發(fā)酵液的PH值，然后校正PH；當(dāng)系統(tǒng)接種完成，調(diào)節(jié)好壓力與流量后，系統(tǒng)一可以進(jìn)入發(fā)酵模式，進(jìn)行自動(dòng)控制（溫度、PH、DO），具體的工藝參數(shù)由操作工自己設(shè)定，系統(tǒng)將按設(shè)定好的參數(shù)可以進(jìn)行自動(dòng)控制或操作工手動(dòng)控制。

發(fā)酵培養(yǎng)

取樣完成后，要用PH儀檢測(cè)發(fā)酵液的PH值，然后校正PH；當(dāng)系統(tǒng)接種完成后，把壓力與流量調(diào)節(jié)好，系統(tǒng)則可以進(jìn)入發(fā)酵模式，進(jìn)行自動(dòng)控制（溫度、PH、DO），具體的工藝參數(shù)根據(jù)生產(chǎn)要求自己設(shè)定，系統(tǒng)將按設(shè)定好的參數(shù)可以進(jìn)行自動(dòng)控制或操作工手動(dòng)控制。種子移入種子罐或發(fā)酵罐后控溫培養(yǎng)，罐壓一般0.03-0.05Mpa，轉(zhuǎn)速根據(jù)工藝要求而定，調(diào)節(jié)循環(huán)水的溫度控制發(fā)酵溫度，當(dāng)環(huán)境溫度高于發(fā)酵溫度時(shí)，用冷凝水降溫；當(dāng)培養(yǎng)基溫度低于發(fā)酵溫度時(shí)，用熱水進(jìn)行加熱。PH、DO調(diào)節(jié)由控制系統(tǒng)通過(guò)執(zhí)行機(jī)構(gòu)自動(dòng)加減實(shí)現(xiàn)。泡沫報(bào)警由泡沫探頭檢測(cè)泡沫信號(hào)在觸摸屏以指示燈形式顯示。

注：
1）滅菌前應(yīng)對(duì)PH電極校正，培養(yǎng)過(guò)程中PH的控制使用蠕動(dòng)泵的加酸加堿來(lái)實(shí)現(xiàn)的，酸瓶堿瓶先在滅菌器中滅菌。
2）溶氧（DO）的測(cè)量與控制
   溶氧電極的標(biāo)定：接種前在恒定的發(fā)酵溫度下，將轉(zhuǎn)速及空氣量開(kāi)到最大值時(shí)的溶氧DO值作為100％。
   培養(yǎng)過(guò)程中溶氧測(cè)量和控制：DO值的控制采用調(diào)節(jié)空氣流量和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速來(lái)達(dá)到，轉(zhuǎn)速與溶氧的關(guān)聯(lián)的控制。其次必須同時(shí)調(diào)節(jié)進(jìn)氣量（手動(dòng)）控制。

出料
   本設(shè)備的出料是利用罐壓將發(fā)酵液從出料管道排出，根據(jù)發(fā)酵液的濃度，罐壓可控制在0.05～0.1MPa。
   出料后取出溶氧、PH儀，進(jìn)行清洗保養(yǎng)。
   出料結(jié)束后，應(yīng)立即放水清洗發(fā)酵罐及料路管道閥門(mén)，并開(kāi)動(dòng)空壓機(jī)，向發(fā)酵罐供氣并攪拌，將管路中的發(fā)酵液沖洗干凈。
   如果發(fā)酵罐暫時(shí)不用，則對(duì)發(fā)酵罐進(jìn)行空消，并排空罐內(nèi)、夾套及管道內(nèi)的水。