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二氧化碳培養(yǎng)箱使用前和期間遇到的困難

[2019/10/24]

一、二氧化碳培養(yǎng)箱的選購問題

二氧化碳培養(yǎng)箱主要控制模擬活體內(nèi)環(huán)境相關(guān)的3個基本變量:穩(wěn)定的二氧化碳水平、溫度、相對濕度。要有穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境,就要考慮這三方面的影響因素,選購時,就應(yīng)該對這些“重中之重”有一定的了解才能選到適合自己的儀器。但是,其它的一些方面的“小”因素也不能忽略,因為這些都會影響儀器的使用價值和壽命。選購時,就應(yīng)該從各方面的因素加以考慮。

1、二氧化碳因素:

二氧化碳濃度探測可通過兩種控制系統(tǒng)——紅外傳感器(IR)或熱傳導(dǎo)傳感器(TC)進行測量。當(dāng)二氧化碳培養(yǎng)箱的門被打開時,CO2從箱體內(nèi)漏出,此時傳感器就會探測到CO2濃度的降低,并做出及時的反應(yīng),重新注入CO2使其恢復(fù)到原先預(yù)設(shè)的水平。熱傳導(dǎo)傳感器(TC)監(jiān)控CO2濃度的工作原理是通過測量兩個電熱調(diào)節(jié)器(一個調(diào)節(jié)器暴露于箱體環(huán)境內(nèi),另一個則是封閉的)之間的電阻變化來實現(xiàn)的。箱內(nèi)CO2濃度的變化會改變兩個電熱調(diào)節(jié)器間的電阻,從而促使傳感器產(chǎn)生反應(yīng)以達到調(diào)節(jié)CO2水平的作用。TC控制系統(tǒng)的一個缺點就是箱內(nèi)溫度和相對濕度的改變會影響傳感器的精確度。當(dāng)箱門被頻繁打開時,不僅CO2濃度,溫度和相對濕度也會發(fā)生很大的波動,因而影響了TC傳感器的精度。

2、相對濕度因素: 

培養(yǎng)箱內(nèi)相對濕度的控制是非常重要的,維持足夠的濕度水平才能保證不會由于過度干燥而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。大型的二氧化碳培養(yǎng)箱是用蒸汽發(fā)生器或噴霧器來控制相對濕度水平的,而大多數(shù)中、小型培養(yǎng)箱則是通過濕度控制面板(humiditypans)的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的(其產(chǎn)生的相對濕度水平可達95-98%)。一些培養(yǎng)箱有一個能在加熱的控制面板上保持水份的濕度蓄水池(humidityreservoir),這樣可以增強蒸發(fā)作用,此蓄水池能增加相對濕度水平達97-98%。但是,這個系統(tǒng)也更復(fù)雜,由于復(fù)雜結(jié)構(gòu)的增加一些難以預(yù)料的問題也會在使用過程中出現(xiàn)。 

3、溫度因素: 

保持培養(yǎng)箱內(nèi)恒定的溫度是維持細胞健康生長的重要因素。當(dāng)選購二氧化碳培養(yǎng)箱時,有兩種類型的加熱結(jié)構(gòu)可供選擇:氣套式加熱和水套式加熱。雖然這兩種加熱系統(tǒng)都是精確和可靠的,但是它們都有著各自的優(yōu)點和缺點。水套式培養(yǎng)箱是通過一個獨立的熱水間隔間包圍內(nèi)部的箱體來維持溫度恒定的。熱水通過自然對流在箱體內(nèi)循環(huán)流動,熱量通過輻射傳遞到箱體內(nèi)部從而保持了溫度的恒定。獨特的水套式設(shè)計有其優(yōu)點:水是一種很好的絕熱物質(zhì),當(dāng)遇到斷電的時候,水套式系統(tǒng)就能更可靠地長久保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度準確性和穩(wěn)定性(維持溫度恒定的時間是氣套式系統(tǒng)的4-5倍)。如果您的實驗環(huán)境不太穩(wěn)定(如有用電限制,或者經(jīng)常停電)并需要保持長時間穩(wěn)定的培養(yǎng)條件,此時,水套式設(shè)計的二氧化碳培養(yǎng)箱就是您最好的選擇。而氣套式加熱系統(tǒng)是通過箱體內(nèi)的加熱器直接對箱內(nèi)氣體進行加熱的。

氣套式設(shè)計在箱門頻繁開關(guān)引起的溫度經(jīng)常性改變的情況下能夠迅速恢復(fù)箱體內(nèi)的溫度穩(wěn)定。因此,氣套式與水套式相比,具有加熱快,溫度的恢復(fù)比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點,特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關(guān)的培養(yǎng)。此外,對于使用者來說氣套式設(shè)計比水套式更簡單化(水套式需要對水箱進行加水、清空和清洗,并要經(jīng)常監(jiān)控水箱運作的情況)。在購買氣套式培養(yǎng)箱時,要注意的是:為了不影響培養(yǎng),培養(yǎng)箱還應(yīng)該有一個風(fēng)扇以保證箱內(nèi)空氣的流通和循環(huán),此裝置還有助于箱內(nèi)溫度、CO2和相對濕度的迅速恢復(fù)。 

此外,有些類型的二氧化碳培養(yǎng)箱還具備外門及輔助加熱系統(tǒng),這個系統(tǒng)能加熱內(nèi)門,提供給細胞良好的濕度環(huán)境,保證細胞滲透壓維持平衡,且可有效防止形成冷凝水以保持培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度和溫度。如果您的培養(yǎng)環(huán)境需要精確的控制,那么這個輔助系統(tǒng)則是必不可少的。 

4、微處理控制因素: 

每一個使用者都希望所用的儀器能夠方便好用,微處理控制系統(tǒng)和其它各種功能附件(如高溫自動調(diào)節(jié)和警報裝置、CO2警報裝置、密碼保護設(shè)置、自動校準系統(tǒng)等等)的運用,就使得二氧化碳培養(yǎng)箱的操作和控制都非常的簡便。微處理控制系統(tǒng)是維持培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度和CO2濃度穩(wěn)態(tài)的操作系統(tǒng)。例如PIC微處理器控制系統(tǒng),它能嚴格控制氣體的濃度并將其損耗降至極低水平,以保證培養(yǎng)環(huán)境恒定不變,且能保證長期培養(yǎng)過程中箱內(nèi)溫度精確,并有LED顯示,可設(shè)置、校正溫度和CO2濃度。不同的微處理系統(tǒng)雖然名字不相同,但是其原理與控制效果則無甚區(qū)別,選購時不必太在意它們名字上的區(qū)別,關(guān)鍵是要自己覺得使用起來方便,容易操作,而且要能夠達到所需的控制精度。 

5、污染物因素: 

污染是導(dǎo)致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素,因而,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們設(shè)計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面,并結(jié)合自動排除污染裝置來有效防止污染的產(chǎn)生。例如,鑒于CO2培養(yǎng)箱在使用過程中有時會伴有霉菌生長,為確保培養(yǎng)箱免受污染且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔性,有些公司開發(fā)設(shè)計了帶有紫外清潔功能的增強型CO2培養(yǎng)箱;還有公司設(shè)計的特有銅外殼HEPA濾器能過濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣,可過濾除去99.97%的0.3um以上的顆粒,并能有效殺死過濾時被擋在濾器內(nèi)的微生物顆粒;

此外,自動殺菌裝置能使箱內(nèi)溫度達到90℃從而殺死污染微生物,當(dāng)它與HEPA系統(tǒng)結(jié)合使用就能夠極大的減少污染。這些裝置對于細胞培養(yǎng)來說是必不可少,但選擇何種清潔裝置呢?當(dāng)然功能越多越好的最適用,但是價格也會隨之上升。如果經(jīng)費有限,只能選擇一個價格較便宜的,這時就應(yīng)該配合使用一些消毒劑和除菌劑,經(jīng)常進行消毒滅菌,也能達到貴儀器的效果,只是比較麻煩一點而已?傊瑹o論選擇何種裝置,都要時刻注意保持培養(yǎng)箱的清潔,經(jīng)常清理箱體,這樣才能增加儀器的使用壽命,并使實驗順利進行,保證結(jié)果的可靠性。

 

二、在使用時應(yīng)該注意的事項

1儀器應(yīng)放置在平整的地面上,環(huán)境應(yīng)清潔整齊,干燥通風(fēng);

2、儀器使用前,各控制開關(guān)均應(yīng)處于非工作狀態(tài),調(diào)速旋鈕應(yīng)置于最小位置;

3、不可將流入氣體壓力調(diào)至過大,以免沖破管道及損傷探測器;

4關(guān)好培養(yǎng)箱的門,以免氣體外泄,影響試驗效果;

5每次停機前,各控制開關(guān)均應(yīng)處于非工作狀態(tài)才切斷電源;

6保持培養(yǎng)箱內(nèi)空氣干凈,并定期消毒;9.經(jīng)常注意箱內(nèi)蒸餾水槽中蒸餾水的量,以保持箱內(nèi)相對濕度,同時避免培養(yǎng)液蒸發(fā);

7、不適用于含有易揮發(fā)性化學(xué)溶劑,低濃度爆炸氣體和低著火點氣體的物品以及有毒物品的培養(yǎng)。

8、正確地使用和注意儀器的保養(yǎng),使其處于良好的工作狀態(tài),可延長儀器的使用壽命;

9、制冷系統(tǒng)停止工作后,用軟布擦凈工作腔和玻璃觀察窗;

10、儀器在連續(xù)工作期間,每三個月應(yīng)做一次定期檢查;檢查是否有水滴,污物等落入電機和外露的制冷元件上;清理壓縮機,冷凝器上的灰塵和污物;檢查保險絲,控制元件及緊固螺釘;

11儀器經(jīng)長期使用,自然磨損屬正,F(xiàn)象,應(yīng)聯(lián)系廠家進行維修。