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石磊:快速檢測方法是轉基因檢測的大方向

[2015/4/11]

  2015年4月9日“第八屆中國國際食品安全技術論壇”(以下簡稱:CBIFS 2015)在揚州市揚州會議中心開幕。論壇開幕式的當天同時舉辦了四個專題技術研討會,分別是:食品安全分析檢測技術研討會、食品安全快速檢測技術研討會、食品中微生物及毒素檢測技術研討會、農(nóng)獸藥殘留及重金屬檢測技術研討會。

  在食品安全快速檢測技術研討會中,來自華南理工大學輕工與食品學院的石磊教授做了題為“新型快速轉基因檢測方法在食品中的應用”的主題報告。

  石磊在報告中首先按照檢測對象對食品轉基因方法進行了分類,一種是核酸檢測,其主要采用普通PCR、實時熒光PCR、巢氏PCR、競爭性PCR、基因芯片技術;另一種是蛋白質檢測,主要采用的是ELISA、免疫試紙條、Westem印記技術。石磊題道,國外許多政府檢測機構都在大量使用快速檢測方法,尤其是ATP法、免疫法、阻抗法和顯色培養(yǎng)基法,這些快速檢測方法在國外應用相當成功。國內(nèi)的許多政府檢測機構也都已經(jīng)在使用或正在考慮使用國外先進的快速檢測技術。石磊說,從長遠發(fā)展趨勢來說,快速方法是轉基因檢測的大方向。

  石磊在報告中介紹了目前常用的轉基因檢測方法,如膠體金免疫層析檢測條、PCR—聚合酶鏈式反應技術、熒光PCR技術等。他說,熒光定量PCR(qPCR)技術是目前主流的分子檢測技術,相關產(chǎn)品占據(jù)全球分子診斷市場的一半。然而這種技術 由于核酸檢測過程復雜、實現(xiàn)核酸擴增信號檢測設備價格高、對實驗室硬件條件要求高等問題,只局限于高端市場,普及推廣困難,基層醫(yī)療和檢測機構需求得不到滿足。

  基于此種現(xiàn)狀,石磊及其團隊開發(fā)了新型恒溫熒光核酸擴增分子檢測平臺。據(jù)石磊介紹說,該平臺的反應原理是一種新型的等溫擴增技術,即等溫多自配引發(fā)擴增(IMSA),反應體系是具有鏈置換特性的DNA聚合酶、dNTP、適宜的緩沖液和模板DNA,能夠識別靶DNA7個特異序列的6條引物。他說,該方法特異性強,6條引物對靶序列的7個特異序列區(qū)的識別保證了IMSA擴增的高特異性;且等溫高效,IMSA在等溫條件下擴增,不會因為溫度改變而造成時間的損失,而且受非靶序列的影響小,與PCR相比,其檢測極限更小,僅為幾個拷貝;谶@些優(yōu)點,IMSA在1小時可完成檢測,核酸染料后,肉眼就可觀察結果且反應不需PCR儀和特殊試劑。

  石磊介紹說,IMSA技術已經(jīng)成功產(chǎn)業(yè)化。目前,一臺恒溫熒光檢測儀、搭配一臺金屬浴、一臺混勻器、一臺小型離心機及移液器和檢測試劑盒即可成為一套可移動的轉基因檢測實驗室。