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薄層色譜分析免疫染色法在血清陰性APS中的應(yīng)用

[2017/8/29]

目的：在臨床中，存在部分患者有提示APS的臨床癥狀而傳統(tǒng)抗磷脂抗體檢測(cè)持續(xù)陰性。對(duì)于這部分病例，我們稱之為血清陰性抗磷脂綜合征（SN-APS）。本文探索薄層色譜分析（thin-layer chromatography，TLC）免疫染色法在檢測(cè)SN-APS患者血清中抗體的應(yīng)用意義。
　　
　　方法：收集36名SN-APS患者，19名APS患者，及18名SLE患者，20名抗HCV陽(yáng)性患者的血清，以及32名健康對(duì)照的血清，應(yīng)用TLC免疫染色法檢測(cè)抗磷脂抗體。應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)抗β2GP1抗體，抗膜聯(lián)蛋白A2，抗膜聯(lián)蛋白A5抗體，和抗凝血酶原抗體。Eahy926, 一個(gè)來(lái)自人體的內(nèi)皮細(xì)胞系，用SN-APS患者的血清IgG成分孵育后，應(yīng)用Western blot分析磷脂-白介素-1受體相關(guān)激酶（IRAK）和磷脂-NFκB，應(yīng)用細(xì)胞熒光分析檢測(cè)分VCAM-1，應(yīng)用ELISA檢測(cè)上清中組織因子（TF）。
　　
　　結(jié)果：TLC免疫染色法在58.3%SN-APS患者中檢測(cè)到aPL：抗心磷脂抗體47.2%，抗溶血磷脂抗體41.7%，抗磷脂酰乙醇胺抗體30.5%。36名患者中有6人抗膜聯(lián)蛋白抗體陽(yáng)性。 Eahy926細(xì)胞系經(jīng)SN-APS患者血清IgG孵育后誘導(dǎo)IRAK磷酸化，NF-κB激活，VCAM-1表面表達(dá)及TF釋放。
　　
　　結(jié)論：TLC免疫染色法能夠識(shí)別SN-APS患者血清中的aPL。此外，研究結(jié)果提示這些抗體在體外有促炎及促凝的作用。