細(xì)菌內(nèi)毒素（既熱原）是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的主要成分，少量的內(nèi)毒素靜脈注射就可以引起發(fā)燒即“熱原反應(yīng)”，大劑量注射則可引起血液循環(huán)障礙和內(nèi)毒素休克，嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致死亡。因此，生物制品類、注射用藥劑、化學(xué)藥品類、放射性藥物、抗生素類、疫苗類、透析液等制劑以及植入性醫(yī)療器材必須經(jīng)過(guò)細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)試驗(yàn)合格后才能使用。

 

鱟試驗(yàn) 法是國(guó)際上至今為止檢測(cè)內(nèi)毒素最好的方法，它簡(jiǎn)單﹑快速﹑靈敏﹑準(zhǔn)確，因而被歐美藥典及我國(guó)藥典定為法定內(nèi)毒素檢查法。該法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)和操作簡(jiǎn)便快捷等特點(diǎn)，逐步取代家兔熱原試驗(yàn)，成為注射用藥、靜脈用藥、醫(yī)療器械、食品、水源細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)的最佳方法。

 

鱟試驗(yàn)法所用的試劑為從海洋動(dòng)物鱟的變形細(xì)胞溶解物提取的鱟試劑。目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上的鱟試劑大多為凝膠法鱟試劑。凝膠法鱟試劑是根據(jù)鱟血變形細(xì)胞裂解物和細(xì)菌內(nèi)毒素反應(yīng)，形成凝膠來(lái)目測(cè)判斷是否有細(xì)菌內(nèi)毒素存在，此方法無(wú)法準(zhǔn)確定量。只能得出大于或等于內(nèi)毒素限值或者小于內(nèi)毒素限值的定性結(jié)果。

 

近年來(lái)鱟試驗(yàn)法的應(yīng)用范圍不斷開(kāi)拓，多種原因?qū)е铝四z法鱟試劑已經(jīng)不能滿足鱟試驗(yàn)法發(fā)展的需求：

 

一、制藥工業(yè)生產(chǎn)工藝流程的細(xì)菌內(nèi)毒素水平動(dòng)態(tài)監(jiān)控必須要采用定量法鱟試劑。目前凝膠法鱟試劑大多用于制藥工業(yè)成品出廠前的內(nèi)毒素限量試驗(yàn)。如果發(fā)現(xiàn)內(nèi)毒素含量等于或者大于內(nèi)毒素限值，該批產(chǎn)品不合格，必須銷毀。不合格品的出現(xiàn)將會(huì)對(duì)制藥企業(yè)產(chǎn)生重大經(jīng)濟(jì)損失。而采用定量法鱟試劑對(duì)生產(chǎn)工藝流程進(jìn)行內(nèi)毒素水平的動(dòng)態(tài)監(jiān)控，在內(nèi)毒素水平升高，但還未達(dá)到或超過(guò)內(nèi)毒素限值時(shí)及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，可以避免企業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失。

 

制藥行業(yè)實(shí)行新版GMP的要求：
（1）藥品生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制為質(zhì)量控制中的事前控制。
（2）對(duì)生產(chǎn)過(guò)程進(jìn)行動(dòng)態(tài)控制。
（3）要求取樣方便、微量、操作簡(jiǎn)單、快速、檢查準(zhǔn)確可靠并能自動(dòng)處理數(shù)據(jù)。

定量法鱟試劑靈敏度高，操作自動(dòng)化，可以準(zhǔn)確定量，最適于監(jiān)控內(nèi)毒素含量的變化趨勢(shì)，可以有效控制各環(huán)節(jié)操作，及時(shí)反饋信息給相關(guān)操作部門，能更直觀和更好地控制內(nèi)毒素，可以大大減少不必要的損失。

 

二、在臨床醫(yī)學(xué)上，病人體液中的細(xì)菌內(nèi)毒素水平定量檢測(cè)具有重大意義。病人體液的細(xì)菌內(nèi)毒素含量直接體現(xiàn)了革蘭氏陰性菌感染的程度。體液內(nèi)毒素水平檢測(cè)可以用于快速診斷革蘭氏陰性菌感染引起的膿毒癥及內(nèi)毒素血癥。由革蘭氏陰性菌所引起的內(nèi)毒素血癥及膿毒血癥目前仍是臨床上的主要死亡原因之一。作為臨床早期診斷革蘭氏陰性菌感染的細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)需要幾天時(shí)間，不僅耗時(shí)長(zhǎng)，而且培養(yǎng)陽(yáng)性率很低。廈門市鱟試劑實(shí)驗(yàn)廠有限公司內(nèi)毒素檢測(cè)鱟試劑盒（動(dòng)態(tài)濁度法）采用獨(dú)特配方樣本處理液，有效排除了血漿中各種干擾因素對(duì)鱟試驗(yàn)的干擾，在2小時(shí)之內(nèi)準(zhǔn)確檢測(cè)血漿細(xì)菌內(nèi)毒素含量，是革蘭氏陰性菌感染早期診斷的最佳方法之一。

 

三、根據(jù)鱟試劑中的G因子旁路反應(yīng)而設(shè)計(jì)的真菌（1,3）-β-D-葡聚糖定量檢測(cè)鱟試驗(yàn)是早期快速診斷深部真菌感染的好方法。近年來(lái)隨著廣譜抗生素、激素和免疫抑制劑以及各種導(dǎo)管插管等治療手段的廣泛應(yīng)用，深部真菌感染的發(fā)病率日漸增高。免疫功能低下患者，如 HIV感染者，糖尿病患者，外科大手術(shù)術(shù)后患者等，也易發(fā)生深部真菌感染。目前，深部真菌感染已成為免疫功能低下患者發(fā)病和死亡最常見(jiàn)的原因。診斷真菌病需要進(jìn)行真菌培養(yǎng)，耗時(shí)長(zhǎng),培養(yǎng)陽(yáng)性率很低。廈門市鱟試劑實(shí)驗(yàn)廠有限公司生產(chǎn)出真菌葡聚糖檢測(cè)試劑盒（動(dòng)態(tài)濁度法）可以在2小時(shí)內(nèi)定量檢測(cè)人血漿中的（1,3）-β-D-葡聚糖。為早期快速診斷深部真菌感染診斷提供準(zhǔn)確依據(jù)。

 

定量法鱟試驗(yàn)在藥典上稱為光度測(cè)定法。分為濁度法和顯色基質(zhì)法。濁度法鱟試劑是利用光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)讀取在形成凝膠的過(guò)程中反應(yīng)液渾濁度升高的快慢和內(nèi)毒素濃度成反比例的關(guān)系由軟件轉(zhuǎn)換成內(nèi)毒素的濃度。而顯色基質(zhì)法是在反應(yīng)液中添加人工合成的顯色基質(zhì)，根據(jù)反應(yīng)液中內(nèi)毒素濃度和在孵育終止時(shí)釋放出的顯色基團(tuán)的量之間成正比，定量檢測(cè)樣品中的內(nèi)毒素濃度。

 

無(wú)論是動(dòng)態(tài)濁度法和顯色法鱟試驗(yàn)均需要帶良好溫育系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)光度測(cè)定儀器及配套專業(yè)的內(nèi)毒素和真菌葡聚糖檢測(cè)軟件。lonza品牌的內(nèi)毒素是美國(guó)原裝進(jìn)口鱟試驗(yàn)微生物檢測(cè)系統(tǒng)是專門為細(xì)菌內(nèi)毒素及真菌葡聚糖定量檢測(cè)鱟試驗(yàn)設(shè)計(jì)的微生物檢測(cè)系統(tǒng)。 配套lonza品牌下WinKQCL內(nèi)毒素檢測(cè)與分析軟件、LONZA內(nèi)毒素檢測(cè)儀和其他輔助儀器及除熱原耗材，適用于所有的定量法鱟實(shí)驗(yàn)，是內(nèi)毒素檢測(cè)首選推薦機(jī)型。